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Page 1 sur 27 COURS DE BIOLOGIE CLINIQUE Partie Hématologie Par Prof. Dr D. KAY

Page 1 sur 27 COURS DE BIOLOGIE CLINIQUE Partie Hématologie Par Prof. Dr D. KAYEMBE NZONGOLA NKASU Dr Jean Pierre MUFUTA NTOLO Spécialiste en Biologie Clinique HEMATOPOIESE La moelle osseuse active = siège d’un processus de multiplication et de maturation cellulaire à partir des cellules souches. On distingue plusieurs types de cellules souches : • - Les Cellules Souches Totipotentes (CST) : sont communes aux lignées myéloïdes et lymphoïdes : sous facteurs de croissance dont IL3 et GM-CSF. • - Les Cellules Souches Pluripotentes (CFU-GEMM) : donnent : érythroblastes, granulocytes, monocytes et mégacaryocytes. • Les Cellules Souches engagées ou progéniteurs Donnent des populations pures en réponse à une stimulation spécifique : °BFU-E devient CFU – E qui est stimulé par l’érythropoïétine pour donner la lignée érythrocytaire °GFU – GM : - qui est stimulé par GM – CSF pour donner la lignée granulo-monocytaire; - qui est stimulé par G – CSF pour donner la lignée granulocytaire; - qui est stimulé par M – CSF pour donner la lignée monocytaire; °CFU – Méga : qui est stimulé par la thrombopoïétine → la lignée mégacaryocyto-plaquettaire I. ERYTHROPOIESE Les GR proviennent de cellules souches de la moelle osseuse hématopoïétique. Les cellules souches engagées ou progéniteurs en 6 jours se différencient et subissent une maturation :d’où leurs modifications morphologiques et biochimiques qui passe par une série de stades bien définis et successives: les proérythroblastes, les basophiles I, les érythroblastes basophiles II, les érythroblastes polychromatophiles, les érythroblastes acidophiles, les érythroblastes polychromatophiles, les érythroblastes acidophiles • Entre chacun de quatre premiers stades se situe une mitose, si bien qu’une cellule souche engagée donne théoriquement 16 érythroblastes acidophiles. Page 2 sur 27 • Ces stades érythroblastiques reposent sur plusieurs critères : la taille cellulaire, le rapport nucléo–cytoplasmique, la basophilie du cytoplasme, l’état de condensation de la chromatine. Au cours de ce processus, il y a une réduction progressive du volume cellulaire ( le noyau diminuant plus rapidement que la cellule entière). PROERYTHROBLASTES • Leur nombre est régulé par le nombre d’érythrocytes circulants. • C’est une cellule jeune de 20 – 25 µm de diamètre :cytoplasme bleu foncé , noyau constitué d’euchromatine avec un ou plusieurs gros nucléoles occupant une importante surface du noyau. ERYTHROBLASTES BASOPHILES I et II • Ce sont des cellules de 16 – 18 µm: • cytoplasme bleu foncé , chromatine du noyau se condense en mottes disposées en rayons de roue très caractéristiques. ERYTHROBLASTES POLYCHROMATOPHILES I et II • rapport nucléo–cytoplasmique : décroître, de même que la taille pour atteindre 9 – 12 µm. • L’Hb envahit progressivement le cytoplasme pendant que la basophilie diminue. • L’érythroblaste polychromatophile a la ferritine disposée en amas. ERYTHROBLASTES ACIDOPHILES Le noyau possède un maximum d’hétérochromatine; cellule chargée d’Hb. Les érythroblastes acidophiles parvenus en maturité perdent leur noyau par un mécanisme d’expulsion et deviennent des réticulocytes. RETICULOCYTES Cellules douées de mouvement. Ils gagnent la circulation où il se transforme en GR au bout de 48 Hs. Les réticulocytes contiennent une substance réticulo – filamenteuse mise en évidence par la coloration au bleu de crésyl. L’édification du GR exige beaucoup de matériaux dont : Vit B12 , Folates : qui jouent un rôle dans la synthèse de l’ADN. • Vit B6 : qui jouent un rôle dans la synthèse de porphyrines. • Vit C • Vit E : empêche la péroxydation des lipides. • Protéines • Les oligo-élément: Fer, cuivre, cobalt, zinc, … REGULATION °Facteurs stimulant : l’hypoxie, l’anémie, les hormones (érythropoïétine, thyroxine, testostérone, cortisone et somathormone) °Facteurs inhibant : la polyglobulie, l’atmosphère riche en O2, l’insuffisance thyroïdienne. Attention Q exam passé Page 3 sur 27 II. GRANULOPOIESE • Les granulocytes se caractérisent par de nombreuses granulations dans leur cytoplasme classées en 3 catégories en fonction d’affinité tinctoriale : les granulocytes neutrophiles, éosinophiles et basophiles. • Ces cellules se forment partant d’une cellule souche; dans la moelle osseuse mêlées aux cellules de la série érythrocytaire. • La cellule souche subit des nombreuses divisions et multiplications puis les cellules se développent et deviennent des cellules matures en 4 jours ; • Elles subissent 4 – 5 mitoses, puis élaborent de granulations spécifiques et changent leur taille, la forme des noyaux et la basophilie de leur cytoplasme. • Ceci permet de distinguer les stades suivants de précurseurs : myéloblastes, promyélocytes, myélocytes, métamyélocytes et granulocytes ou polynucléaires. MYELOBLASTES • Cellules de 20 – 25 mm, ovalaire ou arrondie ; rapport N/C élevé; • Le noyau a une chromatine ombragée et quelques nucléoles. • Le cytoplasme est bleu sans granulations ou contient quelques granulations azurophiles. PROMYELOCYTES • Θ=20 mm ,noyau excentré présentant une légère concavité. • Le cytoplasme basophile, avec des granulations azurophiles et neutrophiles. • En regard de la concavité nucléaire s’observe une zone claire occupée par l’appareil de Golgi. MYELOCYTES NEUTHROPHILES • Θ= 15 – 20 mm ; noyau excentré avec la masse chromatinienne bien visible. • Le cytoplasme acidophile contient des granulations neutrophiles. METAMYELOCYTES NEUTHROPHILES • Θ= 12 – 14 mm; noyau réniforme dont la convexité est proche de la membrane cytoplasmique et la concavité correspond au centrosome. • Sa chromatine est dense. POLYNUCLEAIRES NEUTHROPHILES • Θ= 12 à 14 mm • Cette cellule sort de la moelle osseuse pour circuler dans le sang périphérique et jouer son rôle de défense. • Le noyau est segmenté et possède 2 à 5 lobes. Page 4 sur 27 • La chromatine est condensée, mottée sans nucléole. Les granulations sont de type neutrophile. III. THROMBOPOIESE La cellule tête de lignée est le mégacaryocytoblaste. Elle donne naissance par ENDOMITOSE à une cellule géante de plus de 100 mm de f, multinucléée =Mégacaryocyte. Le cytoplasme du mégacaryocyte a un aspect granuleux. Par sa fragmentation il donne naissance aux plaquettes sanguines. ENDOMITOSE = division du noyau sans division du cytoplasme. La morphologie des mégacaryocytes donne trois types de mégacaryocytes en fonction des stades de maturation : MEGACARYOBLASTE ou type I: Cellule à cytoplasme très basophile sans granulations, rapport N/C important. MEGACARYOCYTE BASOPHILE ou type II: Cellule à cytoplasme basophile avec quelques granulations. MEGACARYOCYTE GRANULEUX ou type III: Cellule à cytoplasme acidophile et remplie de granulations. Son noyau est ± segmenté et le rapport N/C est faible. La régulation de la thrombopoïèse se fait par le taux de plaquettes et la thrombopoïétine. LES METHODES D’EXPLORATION EN HEMATOLOGIE L’hématologie comporte trois secteurs distincts : - la cytologie - l’hémostase - l’Immuno-hématologie • Seules les méthodes principales sont citées : Page 5 sur 27 1. LA CYTOLOGIE : • C’est la partie de l’hématologie qui s’occupe des éléments figurés du sang; • étudie : leur synthèse, la forme, leur nombre, leur répartition et leur comportement général dans leur milieu naturel ou dans leur milieu d’étude. Ainsi les méthodes d’explorations sont : - la numération de GR, GB, plaquettes - le dosage de l’hémoglobine - la mesure de l’hématocrite - le frottis sanguin et la formule leucocytaire - le calcul des constantes globulaires : VGM, CCMH, TCMH - le taux des réticulocytes - la cinétique du fer radioactif -l’exploration des constituants de l’hémoglobine : le fer sérique, l’acide folique et vit B12 - le myélogramme - la vitesse de sédimentation La coagulation : Le temps de Quick, le temps de céphaline activé, le temps de thrombine, le temps de reptilase et le dosage de différents facteurs de coagulation et de calcium, le temps de coagulation, le temps de Howells, le dosage des inhibiteurs. La fibrinolyse : PDF, D-dimères, complexes solubles, le temps de thrombine, temps de lyse des euglobulines, le dosage du plasminogène, antithrombine III. 3. L’IMMUNOHEMATOLOGIE - la détermination de groupes sanguins ABO et Rhésus - la détermination de groupes phénotypés c.à.d. en plus des antigènes du système ABO, les différents antigènes des systèmes Rhésus, Kell et Duffy. - le test de compatibilité - la recherche des agglutinines irrégulières (RAI) - le dépistage simple des agglutinines irrégulières (DSAI) - le test d’élutions - le gel test - la technique d’agglutination Page 6 sur 27 METHODES D’INVESTIGATION DE LA FONCTION MEDULLAIRE 1. HEMOGRAMME Cytopénie portant sur une, deux ou trois lignées dans le cas de : - raccourcissement de la durée de vie - insuffisance de production Hypercytose :dans le cas de polyglobulie mais le passage sanguin des éléments immatures produit une pathologie médullaire grave. 2. TAUX DE RETICULOCYTES Permet d’apprécier la production médullaire en cas d’anémie, de pancytopénie ou d’hyperhémolyse. Le résultat donné en % doit être apprécié en valeur absolue en tenant compte du taux des GR. 3. MYELOGRAMME • On le réalise après la ponction de la moelle osseuse à l’aide d’une aiguille à IM – Chez l’Adulte : ponction sternale, ponction iliaque – Chez le nourrisson : ponction tubérosité tibiale supérieure – Chez l’enfant : ponction iliaque postérieure. • Les grains de moelle sont étalés par frottis et colorés au MGG ou utilisés pour d’autres investigations. • La lecture comporte : -Un temps d’observation au faible grossissement : apprécier la richesse de la moelle, les cellules étrangères et les mégacaryocytes. -Un temps d’analyse des cellules à l’objectif à immersion (100X) 4. BIOPSIE DE MOELLE • uploads/s3/ red-b-clin-amelioree.pdf