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Ichrak materiels Matériels et méthodes B Matériel et méthode I Echantillonnage C ? est une étape primordiale qui conditionne la qualité des résultats Les échantillons doivent être toujours prélevés aves toutes les conditions d ? asepsie nécessaires dans d

Matériels et méthodes B Matériel et méthode I Echantillonnage C ? est une étape primordiale qui conditionne la qualité des résultats Les échantillons doivent être toujours prélevés aves toutes les conditions d ? asepsie nécessaires dans des contenants stériles de verre qui sont les tubes a essais de large ouverture de capacité d ? environ ml en laissant un espace d ? air d ? au moins cm On a cinq échantillons P P P P et P ont été prélevés séparément de trois poissons d ? élevage de type DAURADE de région de Monastir et menés au laboratoire de microbiologie Les prélèvements e ?ectués à partir des viscères des poissons sont mis dans des bouillons MRS Après l ? incubation de h dans une température de ?C est faite dans l ? étuve Les bouillons MRS deviennent très troubles c'est-à-dire les bactéries commencent de croitre dans les bouillons Les prélèvements e ?ectués à partir des viscères des poissons ont permis d ? obtenir après les étalements sur les boites de pétri plusieurs centaines des colonies sur le milieu de culture utilisé MRS CMatériels et méthodes Figure les colonies des bactéries lactiques dans leurs bouillons MRS II Isolement des souches L ? isolement a été e ?ectué sur un milieu de culture spéciale et sélectif pour les bactéries lactiques qui est le Man Rogosa et sharpe MRS l ? isolement commence par le pré- enrichissement dans le bouillon MRS qui est un milieu liquide permettant la croissance des bactéries sans exigences particulières En milieu aseptisé on prélève tout les viscères des poissons et on les met dans le bouillon MRS ensuite on l ? incube à l ? étuve à C pendant heures Cette étape permet aux bactéries stressées de récupérer leur stabilité La deuxième étape est l ? enrichissement sur des milieux liquides MRS simple avec le tween pour favoriser la croissance des bactéries lactiques CMatériels et méthodes Les colonies prédominantes ont été collectées au hasard et les cultures pures ont été obtenues par repiquage par stries d ? épuisement sur le même milieu gélosé Figure Culture des souches sur la gélose MRS Milieu MRS Le milieu MRS milieu de de Man Rogosa et sharpe de Man et al est composé de g l de peptone de protéase n de g l d ? extrait de baeuf de g l d ? extrait de levure de g l de glucose de g l de polysorbate de g l de citrate d ? ammonium de g l d ? acétate de sodium de g l de sulfate de magnésium de g l de sulfate de maganése et de g l de phosphate dipotassique Le pH ?nal de ce milieu est de Le milieu est ensuite stérilisé par autoclavage durant min à bar C ? est un milieu sélectif milieu d ? isolement spéci ?que pour les bactéries lactiques CMatériels et méthodes III Identi ?cation phénotypique Les souches ont été caractérisées par quelques tests classiques tels que Test de la catalase