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Determination des formes circulantes de la bilirubine et

DETERMINATION des formes circulantes de la bilirubine et variations physiopathologiques BIOCHIMIE CLINIQUE CMEMBRES DU GROUPE II FOTSO DZUNA Lloyd Venceslas MAGNE KAMTO Albertine ALACTIO TANGUEU Vanessa Ornella NGUEMDJO Nickelle Vanessa YOMI NANA Vanessa Flora NKENGA NJATCHIE Dolly CPLAN INTRODUCTION GENERALITES METHODES DE DETERMINATION DE LA FORME DE BILIRUBINE CIRCULANT VARIATIONS PHYSIOLOGIQUES DE LA BILIRUBINE VARIATIONS PHYSIOPATHOLOGIQUES DE LA BILIRUBINE CINTRODUCTION ? La bilirubine est un pigment de couleur jaune qui provient de la dégradation de l ? hémoglobine ? Localisation principalement dans la Bile ? produite par les cellules de la rate et de la moelle osseuse ? Existe sous deux formes BILI LIBRE ou INDIRECTE ou NON CONJUGUEE toxique BILI DIRECT ou CONJUGUEE ? BILI TOTALE BILI LIBRE BILI CONJUGUEE ? Bilirubinémie normale - umol l CGENERALITES CSynthèse de la bilirubine C CPourquoi prescrire un dosage de la bilirubine Le dosage de la bilirubine est prescrit en cas de jaunissement de la peau ou quand un dysfonctionnement du foie ou de la vésicule biliaire est suspecté CMETHODES DE DETERMINATION DE LA FORME DE BILIRUBINE CIRCULANT ? Détermination de la bilirubine par Diazotation ? Methode Acide Sulfanilique ? Recherche dans les urines bandelettes réactives ? Méthode colorimétrique CExploration fonction biliaire Pigments biliaires ? Bilirubine libre insoluble non diazotable par la réaction de Van Den Berg ? Nécessité d ? une solubilisation Caféine Méthanol ? Bilirubine Indirecte ? Bilirubine Conjuguée Soluble diazotable par la réaction de Van Den Berg Bili Directe CMéthode Colorimétrique Principe La Bilirubine directe est couplée avec de l ? acide sulfanylique diazotisé pour former une coloration azo? que Ce test utilise une méthode point ?nal et un étalonnage points PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS ET PREPARATION Sérum plasma hépariné ou plasma EDTA Les échantillons sont stables pendant jours à température ambiante et à l ? abri de la lumière CDétermination de la bilirubine par Diazotation Principe La bili totale est dosée en présence de caféine selon une réaction de diazotation avec l ? acide sulfanilique diazoté Par ailleurs le dosage de la bili conjuguée se fait en absence de caféine Prélèvement des échantillons et préparation ? Patient à jeun depuis heures ? Sérum plasma recueillis sur heparinate de lithium ? Conservation C pendant mois à l ? abri de la lumière CVARIATIONS PHYSIOlogiques DE LA BILIRUBINE Valeurs Normales de la Bili Totale Sang du cordon Nouveau-né heures Nouveau-né heures Nouveau-né heures à jours re semaine e semaine e semaine e semaine Enfant adulte - mg L mg L mg L mg L mg L - mg L - mg L - mg L - mg L - mg L - mol L mol L mol L mol L mol L - mol L - mol L - mol L - mol L - mol L CBilirubine libre indirecte Enfant adulte - mg L - mol L Bilirubine conjuguée directe Enfant adulte - mg L - mol L CPlusieurs facteurs peuvent faire varier le taux de bilirubine dans le sang ? le sexe les valeurs sont plus élevées chez l