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http://www.easynotecards.com/notecard_set/32197 I- LE CONTROLE DES MICROORGANIS

http://www.easynotecards.com/notecard_set/32197 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES Comparaison de l’activité antibactérienne de quelques agents chimiques Ammonium Quaternaire (chlorure de benzalkonium) 86 Formes Spectre d'action Activité - Oxyde d'éthylène (à 20% dans CO2 + CHFCl2) Agent stérilisant très efficace Très toxique - Dénaturation des protéines et acides nucléiques - Sporicide Les gaz stérilisants Utilisation - Stérilisation de produits ou objets instables à la chaleur - Désinfection de locaux Les essences naturelles Activité - Pouvoir bactériostatique (composés phénoliques, terpéniques) Les + utilisées - Essence d’eucalyptus : antiseptique des voies respiratoires - Essence de girofle : désinfectant et cautérisant en chirurgie dentaire - Essence de thym : antiseptique intestinal et respiratoire - … I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES 87 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES Exemple : Notice d’un spray assainissant aux huiles essentielles Question : Conditions de tests par rapport aux conditions d’utilisation? 88 I.4- Evaluation de l'efficacité d'un agent antimicrobien Méthode du coefficient phénol (test d’évaluation) Désinfectant de référence : Phénol Bactéries de référence : Salmonella typhi et Staphylococcus aureus Température du test : 20 ou 37°C Contrôle des agents = processus complexe soumis à des règlementations 1ère phase - Test d’évaluation dans des conditions bien définies  Vérification de l’efficacité de l’agent  Détermination des concentrations d’utilisation + durée d’action 2ème phase - Analyse dans des conditions proches des conditions d’utilisation I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES 89 Méthode du coefficient phénol I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES PC = 320 / 160 = 2 Désinfectant Phénol Exemple de résultats sur 1 bactérie-cible (après incubation des sous-cultures) Dilution Dilution Copyright © 2004 Pearson Education, Inc., publishing as Benjamin Cummings PowerPoint ® Lecture Slide Presentation prepared by Christine L. Case Croissance Abs. de Croissance 90 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES + : Croissance; 0 : Absence de croissance http://www.tutorsglobe.com/homework-help/microbiology/phenol-coefficient-technique-72664.aspx Méthode du coefficient phénol Autre exemple de résultats sur 1 bactérie-cible 91 Phenol coefficients for some disinfectants I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES (Composé phénolique) (Comp. phénolique chloré) Méthode du coefficient phénol QAC : Quaternary Ammonium Compound (QAC) (Comp. organomercuriel) (Comp. organomercuriel) (QAC) 92 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES 93 (test sur milieux solides ensemencés dépôt des disques incubation) Sensibilité ou non I.4- Evaluation de l'efficacité d'un agent antimicrobien Méthode du coefficient phénol Technique d’évaluation utile Pb : Souches pures & Conditions contrôlées →Réalité : Populations complexes & Présence de matière organique & Variations de facteurs de l’environnement I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES Méthode des "porte-germes" Test sur un support = porte-germes (ex. cylindres d'acier inoxydables) Contamination : conditions contrôlées & espèces spécifiques Méthode choisie en fonction d'une situation réelle particulière Autres méthodes de comparaison des vitesses de destruction de bactéries sélectionnées par ≠ agents chimiques 94 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES En résumé… 95 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES En résumé… 96 I- LE CONTROLE DES MICROORGANISMES II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE III- LA MICROBIOLOGIE ALIMENTAIRE & Source principale : Prescott’s Microbiology Traduit chez Ed. De Boeck Université BIOTECHNOLOGIES MICROBIOLOGIE APPLIQUEE 97 II.1- Le développement de la chimiothérapie Chimiothérapie - Agents chimiothérapeutiques (antibiotiques) • Principe de base de la chimiothérapie : « Toxicité sélective » - P. Ehrlich, 1909 Essais avec des dérivés arsénicaux Salvarsan actif contre spirochète de la syphilis Concept de toxicité sélective démontré Essais de centaines de composés pour leur potentiel thérapeutique = 1ère grande victoire de la chimiothérapie Développement de la chimie des colorants (2nde moitié 19ème) Essor des colorants synthétiques Utilisation de colorants pour observer tissus / microorganismes  Contexte :  Travaux de Ehrlich : Recherche de colorants aux propriétés thérapeutiques Rouge Trypan actif contre le trypanosome 1)- Fixation spécifique sur des pathogènes 2)- Action de destruction à forte concentration II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE Définitions 98 • Le sulfamide et ses dérivés (2ème étape) – G. Domagk, 1935 Toxicité sélective du rouge Prontosil (Domagk, 1935) Protection contre les streptocoques et les staphylocoques Activité in vivo (souris & humain) – absence d’activité in vitro = Véritable facteur actif (J. et T. Tréfouel, 1935) Etude du sulfamide et de ses dérivés (> 5000 synthétisés en – de 10 ans)  Fin années 1920 - Important fabricant de matières colorantes → G. Domagk : utilisation possible de ces produits dans le traitement d’infections bactériennes? Synthèse du sulfamide possible en laboratoire Rouge Prontosil converti en para-aminobenzène – sulfanilamide ou sulfamide Sulfanilamide : 1ère substance bactéricide d’usage courant Procédures d’analyses rigoureuses (A.M.M.) II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE 99 • Les antibiotiques (3ème étape) - A. Fleming, 1929  1877 : Pasteur et Joubert - Pouvoir bactériostatique de certains microorganismes vis à vis d’autres  1929 : Fleming - Inhibition de la croissance de staphylocoques par des moisissures du genre Penicillium - Extraits de Penicillium bactéricides et non toxiques pour les cellules animales - Principe actif = pénicilline II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE  1939 : Florey et Chain - Purification de la pénicilline - Essais thérapeutiques : résultats spectaculaires (drogue miracle)  2nde Guerre Mondiale : Production industrielle de la pénicilline  Depuis 1965 : Développement d'antibiotiques semi-synthétiques Nouvelle définition d’antibiotiques  1939 + 20 ans ~ : Isolement de centaines d'antibiotiques - Source principale, les Streptomyces, bactéries filamenteuses (Voir Tableau dia suivante) = Principaux antibiotiques encore utilisés 100 II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE 101 II.2- Les caractéristiques générales des substances antimicrobiennes • Toxicité sélective ( niveau / dose thérapeutique et dose toxique )  Indice élevé : Inhibition fonction microbienne spécifique (ex. Pénicilline)  Indice faible : → Inhibition même processus (Microorganismes / Cellules hôtes) → Cellules hôtes affectées par un autre mécanisme • Effets secondaires = Effets indésirables (voir Tableau dia suivante) • Spectre = Champ d’efficacité (voir Tableau dia suivante) → Spectre étroit → Spectre large → Liés à l’effet pharmacologique (diarrhées – mycoses) → Non liés (allergies) II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE • Indice thérapeutique ( rapport dose toxique / dose thérapeutique ) Classement / groupe microbien cible 102 II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE 103 • Effets (voir Tableau dia précédente) Substance bactériostatique : CMB >> CMI (CMB /CMI > 32) bactéricide : CMB /CMI > 2 -4 (32 > CMB /CMI > 2-4) Souche tolérante à un ATB à effet -cide : CMB /CMI > 32 → Effet –cide : variable (concentration, espèce cible) → Effet –statique : croissance inhibée réversiblement Elimination de l’infection : fonction des mécanismes de résistance propres à l’hôte • Evaluation de l’efficacité → Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) [Minimum Inhibitory Concentration (MIC)] → Concentration Minimale Létale (CML) ou Bactéricide (CMB) [Min. Lethal Conc. (MLC)] • Synthèse (par des microorganismes ou méthodes chimiques) → Antibiotiques naturels (synthétisés par bactéries ou mycètes) → Agents chimiothérapeutiques synthétiques (anti -bactériens, -viraux, -protozoaires) → Antibiotiques semi-synthétiques (naturels + groupes chimiques) → Détermination des CI50 – CI90 – CL50 [IC50 – IC90 - LC50] II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE 104 Tiec et al. 2002. La lettre de l’infectiologue. → Détermination des CI50 et CI90 : Exemple II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE 105 Effet du cuivre sur la croissance de TC8 Test en microplaques (VNSS): Croissance de TC8 en présence de différentes concentrations en cuivre (7h d’incubation) Choix des concentrations d’intérêts Concentrations retenues : 400µM (CE25) et 700µM (CE50) Contexte & tests préliminaires Matériels et méthodes Résultats et discussion Conclusion et perspectives 106 Croissance de TC8 en fonction du temps et pourcentage de croissance de TC8 à 7h (pour différentes concentrations en cuivre) Dia oral M2 L. Kerloch CE : Concentration efficace [EC] uploads/Industriel/ b44-microbio-l2sv-cours-4-2019-20.pdf