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Fichemetropol metropol 154

Endotoxines M- Cette méthode décrit le prélèvement en mode Actif sur cassette et l'analyse par spectrophotométrie de la des substance s Endotoxines Données de validation Validation partielle Numéro de la méthode M- Ancien numéro de ?che Substances Informations générales Nom Endotoxines Nom Endotoxines Substance données de validation Endotoxines Validation Famille de substances AGENTS BIOLOGIQUES BIOAEROSOLS Principe et informations Les endotoxines sont des lipopolysaccharides LPS présents dans la membrane externe des bactéries à GRAM négatif Ce sont des molécules complexes de poids moléculaire élevé à daltons constituées à la fois d ? une partie polysaccharidique et d ? une partie lipidique La partie lipidique appelée le lipide A est composée de deux dérivés de glucosamine sur lesquels sont attachés à acides gras ainsi que des phosphates et pyrophosphates Le lipide A est responsable des activités toxiques du LPS La partie polysaccharidique est composée de deux éléments une partie appelée le polysaccharide central noyau interne et externe et une partie appelée cha? ne latérale O La composition chimique du polysaccharide central varie d ? une espèce à une autre Chez Salmonella il est constitué de sucres possédant une structure particulière La cha? ne latérale O ou antigène O est une cha? ne polysaccharidique courte directement liée au polysaccharide central Sa composition varie d ? une espèce à une autre mais également au sein d ? une même espèce Le polysaccharide est responsable des activités antigèniques du LPS Les endotoxines peuvent être libérées lors de la croissance et de la lyse cellulaire et être présentes dans les bioaérosols A l ? heure actuelle il n ? existe ni VLE ni VME pour les endotoxines en milieu professionnel Toutefois la valeur de Unités d ? Entotoxines m UE m est adoptée aux Pays-Bas et est régulièrement évoquée dans la littérature Principe L ? échantillonnage de l ? air est e ?ectué par ?ltration sur ?ltre en ?bre de verre à l ? aide de cassettes porte- ?ltre Les endotoxines sont extraites à partir des ?ltres par agitation dans de l ? eau puri ?ée stérile et apyrogène et le dosage des endotoxines dans les extraits est e ?ectué par la méthode au lysat d ? amoebocytes de limule LAL Principe de prélèvement et d'analyse Etat physique Type de prélèvements Technique analytique Particules en suspension liquides ou et solides Actif SPECTROPHOTOMETRIE Domaine d'application Substance Endotoxines www inrs fr m etropol Endotoxines M- - Page CListe des réactifs EDSA ENDOTOXINES LYOPHILISEES DE ESCHERICHIA COLI B REACTIF LAL LYOPHILISE manpi des labo http www inrs fr media html refINRS ED Méthode de prélèvement Prélèvement des aérosols par cassette fermée http www inrs fr dms inrs PDF metropol-prelevement-cassette pdf Nombre d'éléments dispositifs composant le dispositif en série Dispositif de prélèvement Type de dispositif CASSETTE mm pièces Support ou substrat de collecte FILTRE FIBRE DE VERRE TAMPON EN CELLULOSE Préparation du substrat Les ?ltres en ?bre de verre sont dépyrogénéisés à l'étuve à C pendant minutes Commentaires conseils consignes La préparation des cassettes de prélèvement est e ?ectuée sous