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Detm histamin Les principales méthodes de dosage de l'histamine Les méthodes de séparation Chromatographie Liquide Haute Performance HPLC Méthode de référence pour l'Union Européenne Principe Comme toutes les chromatographies cette méthode vise à séparer

Les principales méthodes de dosage de l'histamine Les méthodes de séparation Chromatographie Liquide Haute Performance HPLC Méthode de référence pour l'Union Européenne Principe Comme toutes les chromatographies cette méthode vise à séparer les constituants d'un mélange et repose sur l'utilisation d'une phase mobile et d'une phase stationnaire La HPLC repose sur la circulation d'un uide phase mobile dans une colonne phase stationnaire Les amines biogènes sont extraites de l'échantillon à tester puis on pratique une dérivatisation de ces amines avant ou après passage dans la colonne La solution à tester est ensuite injectée dans la colonne o? les constituants vont être retenus inégalement en fonction de leur taille et de leur composition Ils vont donc mettre plus ou moins de temps à la parcourir Le uide est récupéré à la sortie de la colonne On peut alors déterminer la quantité et le type de constituants dans le uide car ils arrivent les uns après les autres dans le récipient à l'aide de méthodes de mesure précises en général par uorimétrie Les résultats sont exprimés en mg d'histamine kg Avantages Cette méthode est très précise sensible et reproductible Inconvénients Cette méthode nécessite un équipement sophistiqué donc cher et du personnel spéci ?quement formé à ce matériel Méthode AOAC Méthode de référence pour les Etats-Unis et le Codex Alimentarius Principe L'histamine est extraite de l'échantillon avec une solution de méthanol à L'extrait méthanolique est passé dans une colonne échangeuse d'ions puis l'histamine éluée est complexée avec de l'orthophthaldialdéhyde OPT dérivé uorescent Le résultat est mesuré par uorimétrie Avantages Cette méthode est très précise sensible et reproductible Inconvénients Cette méthode est longue à mettre en ?uvre et elle doit être e ?ectuée par des analystes expérimentés Département STAM - Octobre ?? Fiche de synthèse réalisée pour le centre de veille des produits aquatiques http veilleproduitsaquatiques com C- Chromatographie en phase gazeuse CPG Principe Comme toutes les chromatographies cette méthode vise à séparer les constituants d'un mélange et repose sur l'utilisation d'une phase mobile et d'une phase stationnaire Dans ce cas la phase stationnaire est une colonne et la phase mobile est un gaz porteur Les amines biogènes sont extraites du produit à tester avec du méthanol alcalin puis le mélange est décomposé par chau ?age à l'entrée de la colonne A la sortie de cette colonne la détection se fait gr? ce à un détecteur à ionisation de amme Avantages Cette méthode est très précise reproductible sensible et rapide minutes par échantillon Inconvénients Cette méthode nécessite un équipement sophistiqué donc cher et du personnel spéci ?quement formé à ce matériel Chromatographie sur couche mince CCM ou TLC Principe Comme toutes les chromatographies cette méthode vise à séparer les constituants d'un mélange et repose sur l'utilisation d'une phase mobile et d'une phase stationnaire Dans ce cas la phase stationnaire est un adsorbant gel de silice souvent et la phase mobile est un solvant L'histamine est extraite avec un solvant puis les di ?érents composants du uide vont migrer plus ou moins en fonction de