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Td fiche 3 hhh USTO FSNV DGMA S L - Cours TD Génétique des procaryotes Pr SAIDI-OUAHRANI N TD FICHE Exercice Soit une culture d'E coli sensible à la streptomycine dont la dilution - étalée à raison de ml sur un milieu gélosé en bo? te de Pétri donne après

USTO FSNV DGMA S L - Cours TD Génétique des procaryotes Pr SAIDI-OUAHRANI N TD FICHE Exercice Soit une culture d'E coli sensible à la streptomycine dont la dilution - étalée à raison de ml sur un milieu gélosé en bo? te de Pétri donne après incubation colonies ml de cette culture est étalé sur un milieu gélosé additionné d'un antibiotique la streptomycine à une dose supérieure à la CMI Après incubation la bo? te de Pétri montre colonies Quel est le taux de mutation des résistants à la streptomycine Quel est le phénotype des colonies La culture initiale est traitée par un agent mutagène la nitrosoguanidine puis étalée comme précédemment à raison de ml sur le même milieu gélosé à la streptomycine GN Stp Après incubation la bo? te de Pétri montre colonies Calculez le taux de mutation Tm des résistants Comparez cette valeur à celle trouvée précédemment et conclure Exercice Six clones d'E coli numérotés de à sont cultivés sur milieu minimum MM additionné de thréonine Thr leucine Leu Phénylalanine Phe et cystéine Cys puis repiqués par la technique du tampon de velours sur huit milieux minimum Mm diversement additionnés d'un ou de plusieurs de ces quatre acides aminés comme indiqué sur la ?gure Les clones qui poussent sur les bo? tes de Pétri sont indiqués par leurs numéros Indiquer les phénotypes de clones CUSTO FSNV DGMA S L - Cours TD Génétique des procaryotes Pr SAIDI-OUAHRANI N Exercice On mélange une souche d'E coliK Hfr portant les marqueurs T L pouvoir de synthétiser la thréonine et la leucine T s sensible au phage T Lac fermentant le lactose Gal fermentant le galactose Strs streptomycine sensible et une souche F- portant les marqueurs T- L- T r Lac- Gal- et Strr On interrompt la conjugaison aux temps indiqués ci-contre et on étale pour chaque temps des échantillons sur des milieux qui permettent de cribler les recombinants Les résultats sont mn T L Gal- Lac- Strr T r mn T L Gal- Lac- Strr T s mn T L Gal- Lac Strr T s mn T L Gal Lac Strr T s Déterminez l'ordre des gènes T L Gal Lac T s Exercice On réalise une expérience de transformation bactérienne avec une souche auxotrophe pour la Thymine et l ? Arginine et de l ? ADN puri ?é à partir d ? une souche auxotrophe pour l ? Arginine Des fractions diluées identiques sont étalées sur milieu minéral glucose milieu et sur milieu minéral glucose Arginine milieu On observe colonies sur le milieu et colonies sur le milieu Calculer le de recombinaison entre les deux marqueurs d ? arginine Exercice Une souche bactérienne auxotrophe pour la lysine est transduite par un lysat d ? une souche auxotrophe pour l ? Arginine On étale une fraction diluée de cette culture sur un milieu minéral glucose Arginine et une fraction identique sur milieu minéral glucose On obtient colonies sur le milieu et colonies sur le milieu Expliquer l ? apparition des